RNA pull-down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验手段之一,主要应用于发现miRNA,lncRNA或mRNA的调节靶点,是研究miRNA或lncRNA的利器之一。
原理
RNA pull down 原理示意图
使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过western blot实验或MS检测与RNA相互作用的蛋白。
客户提供
1、样本:细胞,≥1*107;组织,≥0.5g,干冰运输;
2、目的基因信息(ID号)
3、若研究已知靶蛋白,提供靶蛋白信息和靶蛋白的一抗。
美轩提供
1、基因合成测序报告,构建含目的基因的质粒、测序报告等
2、探针序列
3、Western Blot结果或质谱图及蛋白质比对结果